Vergleich zweier Impfprotokolle zur Prävention einer natürlich vorkommenden Lawsonia Enteritis bei Fohlen
Lawsonia intracellularis(LI) ist ein gramnegatives Bakterium und der Erreger der Equinen Proliferativen Enteropathie (EPE), einer Darmerkrankung mit Proliferation der Kryptepithelzellen beim Pferd. Betroffen sind vor allem Fohlen nach dem Absetzen von der Mutterstute. Erkrankte Fohlen zeigen eine Vielfalt unspezifischer Symptome, die von plötzlich auftretender Abmagerung, Lethargie und Anorexie bis hin zu schweren Durchfällen und Koliken reichen können. Typisch für die Proliferative Enteropathie des Pferdes ist ein rapider Abfall der Totalprotein- und Albuminwerte im Blut betroffener Tiere. Die hier vorliegende Impfstudie wurde im Rahmen eines Monitoringprogrammes auf einem Warmblutgestüt in der Saison 2019/2020 durchgeführt. Durch engmaschige, klinische Kontrollen und Bestimmung von Totalprotein und Albumin im Serum aller Fohlen, wurde eine Früherkennung erkrankter Tiere angestrebt. Neben diesem Monitoringprogramm wurde die hier ausgewertete Impfstudie, die 440 Fohlen mit einbezog, durchgeführt. Bei den randomisiert ausgewählten Fohlen wurde eine einfache (Gruppe 1; n = 147) oder zweifache (Gruppe 2, n = 147) intrarektale Impfung gegen Lawsonia intracellularis durchgeführt. Der dafür genutzte Impfstoff Enterisol Ileitis® (Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH) ist in Deutschland für die orale Impfung von Schweinen zugelassen und wurde bereits in den USA beim Fohlen erfolgreich getestet. Die restlichen Fohlen (n = 146) bildeten eine ungeimpfte Kontrollgruppe (Gruppe 3). Im ersten Teil der Studie wurden die Erkrankungsraten sowie die Totalprotein- und Albuminverläufe des Monitoringzeitraumes zwischen den drei Gruppen verglichen. Im zweiten Teil der Studie (siehe Veröffentlichung) wurden von 210 der 440 Fohlen in Serumproben des Impfzeitraumes die Konzentration der Antikörper gegen Lawsonia intracellularis mittels IPMA gemessen. Ziel dieser Studie war es, die Wirksamkeit des Impfstoffes auf einem großen Warmblutgestüt in Deutschland zu untersuchen und die Wirksamkeit zwischen einer einfachen und einer zweifachen Impfung bei Fohlen zu vergleichen. Die Analyse der Antikörpertiter diente dem Vergleich der humoralen Immunantwort der unterschiedlichen Gruppen im Impfzeitraum. Diese Analyse sollte ebenfalls Aufschluss darüber geben, ob eine Serokonversion im Impfzeitraum Anhaltspunkte über die Wirkung der Impfung liefert. Der Verlauf von Totalprotein und Albumin über den Monitoringzeitraum (analysiert wurden hierfür zwölf Zeitpunkte) zeigte keinen Unterschied zwischen den drei Gruppen. Insgesamt wiesen 60 Fohlen während des Monitorings eine Hypoproteinämie (Totalprotein < 50 g/l) und oder eine Hypoalbuminämie (Albumin < 25 g/l) auf. Bei sechs der auffälligen Fohlen wurde daraufhin eine EPE diagnostiziert. Unter den erkrankten Tieren befanden sich ein Fohlen aus Gruppe 1 (einmal geimpft), ein Fohlen aus Gruppe 2 (zweimal geimpft) und vier Fohlen aus Gruppe 3 (ungeimpfte Kontrollgruppe). Die statistische Auswertung zeigte dabei keinen signifikanten Unterschied zwischen den drei Gruppen in Bezug auf die Anzahl an Fohlen mit auffälligen Blutwerten (p = 0,2) und die Anzahl erkrankter Tiere (p = 0,3). Alle betroffenen Fohlen wurden in der, dem Gestüt angeschlossenen, Klinik antimikrobiell und symptomatisch behandelt und überlebten die Erkrankung. Dabei wurde kein Unterschied in Bezug auf Behandlungsdauer und Menge an transfundiertem Plasma zwischen den Erkrankten der drei Gruppen festgestellt. Die serologische Auswertung der Antikörper gegen LI im Impfzeitraum ergab bei 33/70 Fohlen der Gruppe 1 (einmal geimpft), 31/69 Fohlen der Gruppe 2 (zweimal geimpft) und nur 5/71 Fohlen der Gruppe 3 (ungeimpfte Kontrollgruppe) mindestens ein seropositives Ergebnis. Insgesamt lag die Wahrscheinlichkeit einer seropositiven Probe in den Impfgruppen signifikant höher, als in der Kontrollgruppe (angepasstes p = 0,0038 und angepasstes p = 0,049). Auch die Wahrscheinlichkeit einer Serokonversion, also eines Anstieges des Titers um mindestens 60, war in den Impfgruppen signifikant höher, als in der Kontrollgruppe (angepasstes p < 0,0001). Der Vergleich von Gruppe 1 und Gruppe 2 ergab sowohl im Hinblick auf die Wahrscheinlichkeit einer seropositiven Probe als auch in der Wahrscheinlichkeit einer Serokonversion keinen signifikanten Unterschied (angepasstes p = 0,5 bzw. angepasstes p = 0,8). Zusammenfassend lässt sich feststellen, dass Fohlen die intrarektale Applikation von einer beziehungsweise zwei Dosen des Enterisol Ileitis® Impfstoffes dulden und keine Nebenwirkungen durch die Impfung hervorgerufen werden. Des Weiteren bewirkt die Impfung bei fast der Hälfte der Fohlen eine humorale Immunantwort. Diese verläuft jedoch sehr variabel und liefert keine Aussage über die Wirksamkeit der Impfung. Aufgrund dieser Ergebnisse und der geringen Erkrankungsrate in der gesamten Studienpopulation ist eine finale Aussage über die Wirksamkeit der Impfung nicht möglich. Weitere Studien mit einer strikten Trennung von geimpften und ungeimpften Fohlen und der Betrachtung der zellulären Immunantwort sind nötig, um diese Fragestellung weiter zu untersuchen.
Lawsonia intracellularis (LI) is a gram-negative bacterium and the causative agent of equine proliferative enteropathy (EPE), an enteric disease with proliferation of crypt epithelial cells in horses. It mainly affects foals after weaning from the dam. Affected foals show a variety of non-specific symptoms, which can range from lethargy and anorexia to severe diarrhoea and colic. Typical of equine proliferative enteropathy is a rapid drop in total protein and albumin levels in the blood of affected horses. The current vaccination study was performed as part of a large monitoring programme at a warmblood stud in the 2019/2020 season. Based on a close monitoring of the general condition of the foals and determination of total protein and albumin in the serum of all foals, an early detection of diseased animals was aimed at. Besides this monitoring programme, a vaccination study, which included 440 foals, was performed. The foals were randomly assigned for single (group 1; n = 147) or double (group 2, n = 147) intrarectal vaccination against Lawsonia intracellularis. The vaccine Enterisol Ileitis® (Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH), is approved for oral vaccination of pigs in Germany and has already been successfully tested in foals in the USA. The remaining foals (n = 146) formed an unvaccinated control group (group 3). In the first part of this study, the number of foals with EPE and the total protein and albumin courses during the monitoring period were compared between the three groups. In the second part of the study (see publication), serum samples from 210 of the 440 foals were tested for antibodies against Lawsonia intracellularis by IPMA during the vaccination period. The aim of this study was to investigate the efficacy of the vaccine on a large warm-blood stud in Germany and to compare the efficacy between a single and a double vaccination in foals. The analysis of antibody titres was used to compare the humoral immune response among the different groups during the vaccination period. The analysis was expected also to show whether seroconversion after vaccination provides information about the efficacy of the vaccination. The course of total protein and albumin over the monitoring period (twelve time points were analysed) showed no differences between the three groups. A total of 60 foals showed hypoproteinaemia (total protein < 50 g/l), hypoalbuminaemia (albumin < 25 g/l), or both during the monitoring period. Six of these foals were diagnosed with EPE. Among the affected animals was one foal from group 1 (single vaccination), one foal from group 2 (two vaccinations) and four foals from group 3 (unvaccinated control group). The number of foals with hypoproteinaemia/hypoalbuminaemia and the number of affected foals was not significantly different amongst the three groups (p = 0,2 and p = 0,3, respectively). All affected foals were treated with antimicrobials and symptomatically in the clinic attached to the stud and survived the disease. There was no significant difference in the duration of treatment and the amount of equine plasma administered between the affected foals of the three groups. Serological evaluation of antibody titres against LI measured by IPMA during the vaccination period revealed at least one seropositive result in 33/70 foals of group 1 (single vaccination), 31/69 foals of group 2 (two vaccinations) and 5/71 foals of group 3 (unvaccinated control group). Overall, the probability of a seropositive sample was significantly higher in the vaccination groups than in the control group (adjusted p = 0,0038 and adjusted p = 0,049). The probability of seroconversion, an increase in the titre by at least 60, was also significantly higher in the vaccination groups than in the control group (adjusted p < 0,0001). The comparison of group 1 and group 2 showed no significant difference in the probability of a seropositive sample as well as in the probability of seroconversion (adjusted p = 0,5 and adjusted p = 0,8, respectively). In conclusion, foals tolerate the intrarectal application of one or two doses of the Enterisol Ileitis® vaccine and no side effects are caused by the vaccine. Furthermore, the vaccination causes a humoral immune response in almost half of the foals, but the response is very variable and does not provide any information about the efficacy of the vaccination. Due to these results and the low disease rate in the entire study population, a final statement on the efficacy of the vaccination is not possible. Further studies with a strict separation of vaccinated and unvaccinated foals and the analysis of the cellular immune response are necessary to investigate this question further.
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