Klonierung und Charakterisierung Apoptose-assoziierter Gene des Hundes

Bereits seit langem werden Tiermodelle zur Erforschung der Grundlagen menschlicher Krankheiten eingesetzt. Im Falle der Tumorenstehung bietet das spontane Tiermodell Hund Vorteile gegenüber dem Nagetiermodell. Der Hund zeigt mit dem Menschen vergleichbare Eigenschaften in Physiologie und Stoffwechsel bei den meisten Organsystemen und auch im Medikamentenstoffwechsel. Das Vorkommen von Tumoren beim Hund, doppelt so häufig wie beim Menschen, mit Ähnlichkeiten in Phänotyp, Histologie und Biologie sowie die natürliche Entstehung bieten Vorteile gegenüber induzierten Tumoren im Nagetiermodell. Die Charakterisierung Apoptose-assoziierter Gene des Hundes kann eine wichtige Rolle bei der Entwicklung neuer Tumortherapeutika spielen, da die Mechanismen der Tumorentstehung bei Mensch und Hund ähnlich sind. Im Rahmen dieser Arbeit wurden drei beim Menschen bekanntermaßen in den Apoptosesignalweg involvierte Gene für den Hund näher untersucht und charakterisiert. Für die Gene Protein Kinase B gamma, FAS-activated Serin/Threonin-Kinase und Survivin wurden jeweils die genomische Sequenz, die mRNA-Sequenzen und die Proteinsequenzen beim Hund analysiert und mit den Sequenzen des Menschen verglichen. Soweit vorhanden wurde auch ein Vergleich mit den Sequenzen anderer Säugetierspezies durchgeführt. Für Protein Kinase B gamma und FAS-activated Serin/Threonin Kinase wurden außerdem die chromosomale Lokalisation und ein BAC Klon aus der BAC-Bank des DogMap Konsortiums bestimmt. Für Protein Kinase B gamma (AKT3) wurde ein cDNA Klon aus der caninen cDNA-Bank des Zentrums für Humangenetik und ein BAC Klon aus der BAC-Bank des DogMap Konsortiums ermittelt. Außerdem wurde die Lokalisation des Gens auf CFA 7q17 festgelegt. Mehrere Contigs aus der NCBI Datenbank enthalten Teile der genomischen DNA-Sequenz von AKT3. Anhand dieser Sequenzen wurden mRNA und Proteinsequenzen für das canine AKT3 abgeleitet und mit dem Menschen verglichen. Die Homologie der mRNA liegt bei 88 % bzw. 93 % für die humanen Transkriptvarianten. Die Homologie der Proteine beträgt 98,7 %. Für die FAS-activated Serin/Threonin-Kinase (FASTK) wurden ebenfalls ein cDNA Klon und ein BAC Klon ermittelt. Die chromosomale Lokalisation wurde auf CFA 16q14 festgelegt. In der NCBI Datenbank gibt es einen Contig mit der genomischen Sequenz von FASTK. Die abgeleitete mRNA ist zu 90 % bzw. 89 % identisch mit den humanen Transkriptvarianten. Die Homologie der Proteine beträgt 93,8 % bzw. 94,9 %. Für das canine Survivin befindet sich ein cDNA Klon in der cDNA-Bank des Zentrums für Humangenetik. In der NCBI Datenbank gibt es einen Contig mit der caninen genomischen Sequenz von Survivin. Die daraus abgeleitete mRNA und Proteinsequenz wurde sowohl mit bereits bekannten caninen Sequenzen als auch mit humanen verglichen und wären zu 91,5 % bis 99,3 % homolog. Die Entwicklung und Erprobung von auf den Informationen zu diesen Genen beruhenden Tumortherapeutika für den Hund, lassen sich mit hoher Wahrscheinlichkeit gut auf den Menschen übertragen und umgekehrt.