Untersuchungen zum Vorkommen von Scrapie-Prion-Protein in Tonsillenbioptaten genetisch hochempfänglicher Schafe in Niedersachsen

Bei Schafen empfänglicher Genotypen ist eine Ausbreitung des Scrapie-Erregers über lymphatische Bahnen bekannt und eine intravitale Diagnosestellung anhand von Biopsien lymphatischer Gewebe möglich. Die praktische Anwendbarkeit einer Tonsillenbiopsie, und die Gewinnung aussagekräftigen Probenmaterials wurde im Rahmen dieser Dissertation geprüft. Es wurden aus 72 Scrapie-unverdächtigen Schafherden von jeweils zehn Tieren Gewebeproben der Tonsillen und Blutproben entnommen. Anhand der Blutproben wurde eine Genotypisierung durchgeführt, die neben der Aussage über die Scrapie-Empfänglichkeit des einzelnen Schafes eine Übersicht über die Verbreitung von genetisch resistenten Tieren in Niedersachsen ergab. Insgesamt hatten 41% der hier untersuchten Tiere einen resistenten Genotyp der Klassen G1 bis G2, was für die Durchführbarkeit einer Scrapie-Resistenzzucht positiv zu bewerten ist. Die Durchführung der Tonsillenbiopsie war ohne Einschränkungen, im Feld leicht praktikabel. Von 720 Gewebeproben wurden 462 Proben histologisch auf die Anzahl vorhandener Lymphfollikel untersucht. Bei der histologischen Auswertung der Bioptate enthielten allerdings nur 67% der Proben die für die weitere Untersuchung geforderten drei Follikel. Von den 720 entnommenen Bioptaten von Schafen aus Scrapie-unverdächtigen Betrieben wurden 200 Proben ausgewählt, die von Tieren der Genotypklassen G3 bis G5 stammten. Davon wurden jeweils 100 Proben mit IHC und PET blot auf PrPSc getestet, mit jeweils negativem Ergebnis. Im Gegensatz dazu wurden vier Betriebe (A-D) ausgewählt, aus denen mindestens ein Schaf im Rahmen des Scrapie-Monitorings an der TKBA als Scrapie-positiv entdeckt worden war. In drei dieser Herden (A-C) wurde bei allen Schafen, die den Genotyp des bereits an Scrapie verstorbenen Tieres oder einen höher empfänglichen Genotyp aufwiesen, eine Tonsillenbioptatuntersuchung durchgeführt. In allen drei Herden konnten hierbei weitere, positive Schafe präklinisch entdeckt werden. Dabei entsprach in jeder Herde der Genotyp der präklinisch gefundenen, positiven Tiere dem Genotyp des bereits an Scrapie verendeten Tieres. Im Anschluss an die Bioptatuntersuchungen wurden, mit Ausnahme der positiven Tiere, alle übrigen Schafe der Genotypklassen G3 bis G5 im Rahmen der Tierseuchenbekämpfung getötet. Von den getöteten Tieren wurde jeweils eine Gewebeprobe des Hirnstammes mit einem Schnelltest auf PrPSc untersucht. Außer in Herde C wurden keine weiteren positiven Befunde mittels Schnelltest erhoben. In Herde C wurde in den Bioptaten von vier aus insgesamt 49 Schafen PrPSc nachgewiesen. Als Besonderheit konnten bei den durchgeführten Schnelltests, drei weitere positive Tiere entdeckt werden, bei denen eine vorher durchgeführte Bioptatuntersuchung negativ verlaufen war.                                       Aufgrund der großen Anzahl empfänglicher Schafe in Herde D, konnte nur bei einem Teil der empfänglichen Schafe eine Tonsillenbiopsie durchgeführt werden. In dieser Herde verlief der Nachweis auf PrPSc bei allen Bioptaten negativ. 17 Scrapie-positive Schafe, die im Rahmen dieser Dissertation entdeckt wurden, waren Träger des Genotyps ARQ/ARQ. Dagegen entsprachen zwei Scrapie-positive Tiere dem Genotyp VRQ/ARH und ein Tier dem Genotyp VRQ/ARQ. In einer Herde mit ausschließlich empfänglichen Schafen wurde zum Ausschluss eines Scrapie-Verdachts bei allen Tieren eine Tonsillenbiopsie durchgeführt und das Gewebe auf PrPSc untersucht. Ein Scrapie-Vorkommen in der Herde konnte hierbei aufgrund der großen Anzahl unauswertbarer Proben nicht sicher ausgeschlossen werden. Die Resultate dieser Versuche lassen den Schluss zu, dass eine Entnahme von Tonsillenbioptaten zwar unter Praxisbedingungen gut durchführbar ist, die Gewinnung auswertbaren Probenmaterials allerdings für eine zuverlässige Diagnostik nicht ausreicht. Des weiteren ist ein negativer PrPSc-Nachweis im Bioptat nicht aussagekräftig. Um den Scrapie-Status einer Schafherde zu bestimmen, ist die Untersuchung von Tonsillenbioptaten allein nicht geeignet. Dennoch ist die Bioptatuntersuchung lymphatischer Geweben die derzeit einzige Möglichkeit einer TSE-Diagnose am lebenden Schaf. Da für weitere Forschungszwecke lebende, Scrapie-positive Tiere unverzichtbar sind, sollten in positiven Herden vor der Keulung bevorzugt Tiere mittels Biopsie untersucht werden, die dem Genotyp des gefallenen positiven Tieres entsprechen. Für weitere Studien und im Rahmen der TSE-Bekämpfung bleibt zu berücksichtigen, dass der Genotyp ARQ/ARQ mit einem hohen Scrapie-Risiko behaftet ist.