Validierung ausgewählter koproskopischer Untersuchungsmethoden zum direkten Nachweis parasitärer Stadien verschiedener Parasitenspezies der Haussäugetiere

Mit zunehmenden Anforderungen an parasitologische Labors durch Qualitätssicherungs- und -managementsysteme ist die Validierung der dort verwendeten Methoden unabdingbar. Ziel dieser Arbeit war es, mit der Gewinnung relevanter Daten einen Beitrag zur Validierung der in der veterinärparasitologischen Diagnostik gebräuchlichen koproskopischen Methoden unter den hier beschriebenen Bedingungen zum Nachweis parasitärer Stadien hinsichtlich ihrer Sensitivität, Effektivität und des Variationskoeffizienten zu leisten. Die Validierung wurde für die kombinierte Sedimentations-Flotations – und die McMaster-Methode anhand von Eiern von Ancylostoma caninum, Uncinaria stenocephala, Cooperia oncophora, Anoplocephala perfoliata, Ascaris suum, Toxascaris leonina, Toxocara canis, Toxocara cati, Trichuris vulpis, Moniezia expansa und verschiedener Cyathostominae durchgeführt. Die Sedimentation und das Auswanderverfahren nach Baermann wurden als spezielle Nachweisverfahren für Fasciola hepatica bzw. Dictyocaulus viviparus mit Eiern bzw. Larven dieser Parasiten validiert. Mit der hier beschriebenen kombinierten Sedimentations-Flotationsmethode unter der Verwendung von ZnSO4-Lösung konnten die hier untersuchten Parasiten ab einer Eizahl von 80 Eiern pro Gramm Kot sicher (Sensitivität 100 %) detektiert werden. In niedrigeren Eizahlen unterliegt die Sensitivität der Methode zum Teil großen Schwankungen. Die Effektivität der Methode stieg mit zunehmender Eizahl. Bei 80 Eiern pro Gramm Kot wurden 1,5 % der Eier wiedergefunden, die Effektivität unterlag in allen Konzentrationsstufen starken Schwankungen. Da diese Methode aber vorrangig zur qualitativen und semiquantitativen Diagnostik angewandt wird, ist diese vergleichsweise geringe Effektivität von untergeordneter Bedeutung. Mit der McMaster-Methode konnten von den hier untersuchten Parasiten ab einer Eizahl von 500 Eiern pro Gramm Kot keine falsch negativen Proben mehr gefunden werden. Die Varianz in der Sensitivität der Methode nahm mit zunehmender Eizahl pro Gramm Kot ab. Die Effektivität der Methode betrug im Mittel 49 % und unterlag relativ hohen Schwankungen. Die Untersuchung der Unterschiede sowohl zwischen den Parasiten als auch zwischen den Parasitenordnungen ergab zum Teil sehr schwer zu interpretierende Ergebnisse, so dass davon ausgegangen werden kann, dass verschiedene Einflussfaktoren wie unterschiedliche Oberflächenbeschaffenheit, Dichte, Reifezustände, elektrostatische Oberfläche der Eier und unterschiedliche Interaktion des Flotationsmediums mit den Eiern sowie die für statistische Auswertungen immer noch geringe Probenzahl eine größere Rolle spielen als bisher angenommen. Es konnte jedoch für die Sensitivität der untersuchten Methoden gezeigt werden, dass sich die Parasiten nur im unteren Grenzbereich der Sensitivität unterscheiden. Ab einer bestimmten Eizahl pro Gramm Kot ist die Sensitivität für alle Parasiten immer 100 %. Mit der einfachen Sedimentationsmethode nach Benedek konnten Eier von F. hepatica ab 20 Epg sicher nachgewiesen werden. Die Effektivität unterlag starken Schwankungen, die maximale Wiederfindungsrate betrug 20 %. Mit dem Auswanderverfahren nach Baermann wurde für D. viviparus ab einer Larvenzahl von 6,3 pro Gramm Kot aus einer vorher gründlich vermengten Kotprobe eine 100 %ige Sensitivität ermittelt. Der höchste Prozentsatz an Larven wurde in der ungerührten Kotprobe gefunden, er unterlag aber großen Schwankungen und war zum Teil falsch überhöht, was auf die ungleichmäßige Verteilung der Larven in der Probe schließen lässt. Die Ergebnisse zeigen, dass von den hier untersuchten Methoden die beschriebene kombinierte Sedimentations-Flotationsmethode für die qualitative Diagnostik der hier untersuchten Parasiten die Methode der Wahl ist und für die Untersuchung niedriger Eizahlen in epidemiologischen Studien quantifiziert werden sollte. Ob die Methode weiter verbessert werden kann und wie sich andere als die hier untersuchten Parasiten in der Methode verhalten, sollte in weiteren Untersuchungen ermittelt werden. Zur Bestimmung der in einer Probe enthaltenen Eizahl pro Gramm Kot eignet sich die McMaster-Methode nicht für Eizahlbereiche bis 1000 EpG, da hier die Effektivität der Methode für eine zuverlässige quantitative Bestimmung. nicht ausreichend ist. Ab welcher Eizahl pro Gramm Kot sich die Ergebnisse den realen Werten annähern, sollte Gegenstand weiterer Untersuchungen sein. Zur Verbesserung und Standardisierung der Effektivität der McMaster-Methode wurden von verschiedenen Autoren Vorschläge gemacht. Sowohl die Sedimentationsmethode als auch das Auswanderverfahren nach Baermann sind wie hier beschrieben für die mit diesen Methoden untersuchten Parasiten von guter Sensitivität und daher Methoden der Wahl zur qualitativen Diagnostik.