Entwicklung eines Modells zur Bestimmung der sekundären Bioverfügbarkeit von gebundenen Tetracyclin-Rückständen und Anhydrotetracyclin

Zur Bestimmung der sekundären Bioverfügbarkeit von an Knochen gebundenen Tetracyclinen und mögliche Auswirkung auf die Sensibilität der Darmflora gegenüber Tetracyclinen wurde in der vorliegenden Untersuchung ein Modell am Versuchstier entwickelt. Außerdem sollte die Bioverfügbarkeit von Anhydrotetracyclin untersucht werden. Über einen Zeitraum von drei Wochen wurden vierzig weibliche Crl: NMRI-Mäuse unter identischen Laborbedingungen in vier Gruppen mit unterschiedlichen oral zugeführten Substanzen gefüttert / behandelt.   Gruppe A erhielt ein mit Hackfleisch vermischtes tetracyclinhaltiges Knochenmehl mit einem Gehalt von 17574,8 µg Tetracyclin (TC)/kg und einem Gehalt von 8523,0 µg Chlortetracyclin (CTC)/kg, das zu einer durchschnittlichen individuellen oralen Gesamt-Aufnahme von 64,69 µg TC und 31,35 µg CTC führte. Gruppe B erhielt als Kontrollgruppe ein handelsübliches Fertigfutter. Gruppe C erhielt täglich über 15 Tage 20 µg TC-Reinsubstanz oral appliziert. Gruppe D erhielt täglich über 15 Tage 20 µg ATC-Reinsubstanz oral appliziert.   Kot und Urin der Mäuse wurden täglich gesammelt. Die Untersuchung der Urinproben auf die Tetracycline erfolgte wochen- und tierweise gepoolt mittels LC-ESI-MS-MS. Die MHK-Wert-Bestimmung von E. coli-Isolaten aus dem Mäusekot gegenüber TC erfolgte vor Versuchsbeginn und nach Versuchsende mittels Etest®. Weiterhin wurden von jeweils einem Tier der Gruppen A, C und D Oberschenkelknochenproben und Kotproben mittels LC-ESI-MS-MS auf ihren Tetracyclin-Gehalt untersucht.   Es konnte festgestellt werden, dass die im verfütterten Knochenmehl enthaltenen Tetracycline teilweise über den Urin ausgeschieden wurden. Damit wurde erstmals in vivo die sekundäre Bioverfügbarkeit Knochen-gebundener Tetracycline nachgewiesen. Verglichen mit der Gruppe, der TC-Reinsubstanz verabreicht wurde, betrug die Ausscheidung 30,3 %. In der ersten Untersuchungswoche zeigte sich jedoch zwischen den Gruppen A und C kein signifikanter Unterschied im Hinblick auf die TC-Konzentrationen im ausgeschiedenen Urin. In der mit ATC behandelten Gruppe konnten in Urin und Kot nur sehr geringe Mengen des Wirkstoffes nachgewiesen werden, was auf eine Retention im Körper hindeutet. Tetracyclinablagerungen im Knochengewebe der gefütterten / behandelten Tiere konnten nur bei Gruppe C nachgewiesen werden. Eine signifikante Änderung der MHK-Werte gegenüber TC bei aus dem Mäusekot gewonnenen E. coli-Isolaten konnte nicht nachgewiesen werden.   Die festgestellten Ergebnisse haben insbesondere für die Risikobewertung gebundener Tetracyclin-Rückstände in knochenhaltigen Lebens- und Futtermitteln Bedeutung.