Molekulargenetische Untersuchungen zur kongenitalen Mikrophthalmie des Texelschafes

Das Ziel der vorliegenden Arbeit war die Identifizierung der chromosomalen Lokalisation des für die monogen autosomal rezessiv vererbte kongenitale Mikrophthalmie des Texelschafes verantwortlichen Defektgens. Dazu wurde ein komparativer Kandidatengenansatz auf der Grundlage der vielfältigen Kenntnisse über ähnliche Phänotypen bei Mensch und Maus gewählt. Das benötigte Familienmaterial wurde durch Probensammlung im Feld sowie die Etablierung einer experimentell erzeugten Ressourcenfamile gewonnen. An Tieren der Ressourcenfamilie wurden klinische und pathologische Untersuchungen vorgenommen. Dabei wurde die Pathomorphologie der kongenitalen Mikrophthalmie des Texelschafes übereinstimmend mit früheren Untersuchungen charakterisiert. Durch den Zuchtversuch und die klinischen sowie pathologischen Untersuchungen konnte gezeigt werden, dass es ich um eine nicht syndromische isolierte Mikrophthalmie handelt und dass ein rezessiver Erbgang mit vollständiger Penetranz und variabler Expressivität vorliegt. Eine auf die vorhergesagten Kandidatengenregionen fokussierte Kopplungsanalyse mit insgesamt 80 Mikrosatelliten­markern erbrachte mit einem maximalen nicht parametrischen LOD-Score von 4,21 den Nachweis für die Kopplung des putativen Mikrophthalmie-Genortes zu einer Region auf dem ovinen Chromosom 23 im Bereich der Mikrosatellitenmarker ADCY1AP und MAF35. Außerdem zeigte sich, dass durch die Genotypisierung mehrerer Familienmitglieder und anschließender Betrachtung der wahrscheinlichsten Haplotypen Aussagen über den wahr­scheinlichen Mikrophthalmie-Genotyp phänotypisch gesunder Familienmitglieder gemacht werden können, sofern ein betroffenes Tier zur Bestimmung der Kopplungsphasen verfügbar ist. Zur Feinkartierung des Defektgenorts wurde eine umfassende hoch auflösende vergleichende Radiation Hybrid-Karte zwischen ovinen Chromosom 23 und dem humanen Chromosom 18 unter Verwendung eines ovinen 5000 Rad Panels erstellt. Es zeigte sich, dass die Genreihenfolge innerhalb der vier gefundenen syntänischen Chromosomenabschnitte zwischen Schaf und Mensch nahezu vollständig konserviert ist und dass in dieser Hinsicht seh hohe Übereinstimmung mit dem homologen bovinen Chromosom 24 besteht. Auf der Grundlage dieser Ergebnisse konnte gezeigt werden, dass die mit Mikrophthalmie gekoppelte Region im Bereich eines evolutinären Bruchpunktes zwischen zwei bei schaf und Mensch konservierten Chromosomenabschnitten liegt und daher weiter eingegrenzt werden muss.