Zu Wirkungsmechanismus und Aussagefähigkeit des California Mastitis Tests unter besonderen Berücksichtigung der Eutergesundheitsbeurteilung von Auktionstieren

Im Rahmen der Studie sollten Aussagen über den Wirkungsmechanismus der CMT-Reaktion (1. – 4.) und die Präzision des Tests unter Praxisbedingungen (5., 6.) erarbeitet werden. Folgende Teilaspekte wurden untersucht: 1.      Einfluss des Zustandes der DNA geschalmter Zellen auf die CMT-Reaktion 2.      Einfluss der Zellfraktion (PMN/Lymphozyten) auf die CMT-Reaktion 3.      Einfluss der Zellvitalität auf die CMT-Reaktion 4.      Einfluss der Reagenzienwahl auf die CMT-Reaktion 5.      Präzision des CMT als Screeningmethode zur Eutergesundheitsbeurteilung von Auktionstieren 6.      Präzision des CMT unter Bedingungen konventionellen und automatischen Melkens  unter Berücksichtigung weiterer Entzündungsparameter   1.      Zustand DNA: Durch eine Ultraschallbehandlung wurden die Membranen der Milchzellen zerstört, wodurch es zu einem stärkeren Ausfall (p = 0,0026) der CMT-Reaktion im Vergleich zur Reaktion der unbehandelten Proben kam. Eine zweite Behandlung führte zur teilweisen Fragmentierung der DNA, was wiederum eine abgeschwächte – mit der Ausgangsprobe vergleichbare (p = 0,51)  - CMT-Reaktion  hervorrief. Daraus lässt sich folgern, dass nur intakte DNA-Stränge mit dem CMT-Reagenz zu einer Netzbildung, d. h. zu einer sichtbaren Reaktion führen. 2.      Zellfraktion: Nach Gewinnung von PMN und Lymphozyten aus Rinder-Blut und Erstellung von Verdünnungsreihen, wurden die Zellfraktionen vergleichend geschalmt. Hierbei konnte kein signifikanter Unterschied in der Reaktion von Lymphozyten bzw. PMN mit dem CMT Reagenz festgestellt werden. 3.      Zellvitalität: Es wurden VGH geschalmt und die Vitalität der enthaltenen Zellen anschließend im Durchflusszytometer (FACS®) bestimmt. Ein Einfluss der Zellvitalität auf die verschiedenen CMT-Scores in den Zellgehaltsgruppen konnte nicht beobachtet werden. 4.      Reagenzienvergleich: Dreihundertneunundfünfzig VGH wurden mit fünf verschiedenen Reagenzien geschalmt und die CMT-Ergebnisse unter Verwendung einheitlicher Scores (8 Stufen von 0, 0,5, 1, 2 – 6) verglichen. Es konnten signifikante Unterschiede zwischen den CMT-Ergebnissen der Reagenzien (Ausnahme Reagenz B und C) über alle Zellgehaltsgruppen hinweg erfasst werden. 5.      Präzision und Eignung als Screeningmethode zur Eutergesundheits-beurteilung im Rahmen von Auktionen: Im Rahmen des Auktionsversuches wurden 568 Viertel (142 Tiere) jeweils dreimal beprobt: PB (am Tag vor der Auktion auf dem Herkunftsbetrieb – mit anschließendem Melken), PA1 (morgens auf der Auktion, im Rahmen der tierärztlichen Untersuchung) und PA2 (nach Verkauf der Tiere vor der ersten Melkung nach Verlassen des Herkunftsbetriebes). CMT, Gehalt somatischer Zellen (ermittelt in der Fossomatic®) elektrische Leitfähigkeit, NAGase-Aktivität sowie die mikrobiologischen Befunde wurden erfasst und mit folgenden Ergebnissen ausgewertet. a.      Gesunde Tiere bleiben auch unter dem Einfluss von Stress gesund. Von 365 Vierteln mit normaler Sekretion änderten nur ca. 10% ihre Eutergesundheitskategorie-Besetzung über die Probenahmen hinweg. b.      Die Tiere wurden je nach letzter Melkzeit auf dem Herkunftsbetrieb und Ablauf der Auktion bis zu 26 Stunden nicht gemolken. Es bestand ein Einfluss der ZMZ auf die Höhe des Zellgehalts/ml, für den CMT konnte dies nicht abschließend geklärt werden. c.      Der CMT erreichte eine Sensitivität von 95,76%, eine Spezifität von 87,14% und einen Youden-Index von 82,90%. Weitere im Versuch verwendete Parameter zum Entzündungsnachweis zeigten im Vergleich zum CMT eine niedrigere Präzision (Elektrische Leitfähigkeit: Youden-Index 39,61%; NAGase: Youden-Index 23,34%). d.      Der CMT eignet sich durch seine hohe Präzision als Screening-Methode zur Feststellung der Eutergesundheit auf Auktionen. Da die Gefahr von Neuerkrankungen durch Zukauf kranker Tiere in einer Herde sehr bedeutsam ist, kommt insbesondere einer hohen Sensitivität große Bedeutung zu. 6.      Präzision des CMT unter Bedingungen konventionellen und automatischen Melkens: Die Parameter CMT, DCC®,elektrische Leitfähigkeit und NAGase wurden auf ihre Präzision zum Entzündungsnachweis im Vergleich zum Zellgehalt/ml (Fossomatic®) untersucht. a.      Für dasDCC® wurde ein Youden-Index von 88,99% ermittelt, gefolgt von dem CMT (Youden-Index 67,16%), der elektrischen Leitfähigkeit (Youden-Index 41,61%) und der NAGase (Youden-Index 4,02%). b.      Trotz höherer Präzision des DCC®, ist dem CMT als Screening-Methode aufgrund seiner kostengünstigen Anwendung der Vorrang zu geben. c.      Die Untersuchung der Interaktion von SCC- und CMT-Befunden mit Melkzeitintervallen ergab in einer 1-faktoriellen Varianzanalyse keine signifikanten Unterschiede der Ergebnisse von LOGSCC und CMT zwischen den Melkintervallen. Außerdem konnte beobachtet werden, dass ein Melkzeitintervall von unter sechs Stunden bzw. von über 14 Stunden zu erhöhten Zellgehalten/ml führt.