Untersuchungen zur Eutergesundheit von Ziegen sowie durchflusszytometrische Differenzierung capriner Milchzellen

Ziel dieser Studie war einerseits die Ermittlung von Zusammenhängen zwischen dem Vorkommen eines hohen somatischen Zellgehaltes, gesteigerter N-acetyl-β-glucosaminidase (NAGase)-Aktivität, sowie veränderter elektrischer Leitfähigkeit und dem Vorkommen von euterpathogenen Keimen. Zum anderen sollte eine Methode zur schnellen durchflusszytometrischen Differenzierung capriner Milchzellen erarbeitet werden. Die Ermittlung von Milchzelldifferentialbildern ist aufgrund der in der Ziegenmilch vorhandenen zytoplasmatischen Partikel (ZP) sehr arbeits- und zeitaufwändig und wird daher routinemäßig nicht angewendet. Zu diesen Zwecken wurden von Januar 2007 bis Dezember 2007 in 14tägigen, und von März 2008 bis Mai 2008 in wöchentlichen Abständen 1263 Hälftengemelksproben von 174 Ziegen aus einem Demeter-, einem Bioland- und einem konventionell arbeitenden Betrieb in Niedersachsen, sowie der Tierärztlichen Hochschule Hannover und des Erlebnis-Zoos Hannover gewonnen (n = 130, 630, 479, 8, bzw. n = 16). Euterhälften, aus denen keine potentiell euterpathogenen Keime isoliert werden konnten (n = 895), wiesen mit 2,7 x 105 Zellen/ml einen niedrigen Mittelwert auf. Signifikant höhere Zellzahlen (p <0,0001) konnten hingegen in mit Staphylococcus (S.) aureus- bzw. mit koagulasenegativen Staphylokokken (KNS)-infizierten Euterhälften (1,78 x 106 Zellen/ml bzw. 5,69 x 105 Zellen/ml) festgestellt werden. Das Mittel der elektrischen Leitfähigkeit der Proben (n = 1227) lag bei 6,33 ± 0,76 mS/cm. Die NAGase-Aktivität aus bakteriologisch negativen Hälften (n = 890) betrug im Mittel 2,31 nmol x ml -1 x min -1. Euterhälften mit „major pathogens“ wiesen mit durchschnittlich 4,96 nmol x ml -1 x min -1 signifikant höhere Werte auf (p < 0,001). Durchschnittlich konnten 42 ± 31 % ZP in den Proben (n = 1000) ermittelt werden, im geometrischen Mittel 1,09 x 105 ZP/ml. Aus Euterhälften ohne nachweisbaren bakteriologischen Befund wurden durchschnittlich 79,18 ± 11,47 % PMN, davon 65,37 ± 16,26 % vitale und 13,81 ± 9,05 % tote PMN nachgewiesen (Durchflusszytometrische Schnellmethode mit dem Fluoreszenzfarbstoff SYTO®13). Die Anteile an Makrophagen und Lymphozyten lagen mit 17,75 ± 10,22 % bzw. 2,76 ± 3,58 % wesentlich niedriger. Mit KNS infizierte Euterhälften enthielten signifikant höhere Anteile an PMN und niedrigere Gehalte an Makrophagen und Lymphozyten. Vitale Zellen konnten im Mittel zu 76,25 ± 13,59 % nachgewiesen werden. Die Beurteilung des Eutergesundheitsstatus von Ziegen ist komplexer als bei Kühen. Jedoch können unter Berücksichtigung jahreszeitlich und hormonell bedingter Schwankungen die Bestimmung des Gehaltes an somatischen Zellen und die NAGase-Aktivität zur Interpretation herangezogen werden. Die entwickelten durchflusszytometrischen Schnellmethoden sind DNA-spezifisch, erlauben eine objektive Beurteilung von Differentialzellbildern und bieten einen großen Zeitvorteil (das Ergebnis liegt in ca. 45 min vor) im Gegensatz zu den aufwändigen mikroskopisch auszuwertenden Färbetechniken. Damit können sie, unter besonderer Berücksichtigung der Anteile vitaler und nekrotischer Zellen, neue Möglichkeiten in der Beurteilung der Eutergesundheit von Ziegen eröffnen.