Untersuchung zur Pharmakokinetik von Betamethason nach intravenöser und dermaler Applikation hinsichtlich der Dopingrelevanz beim Pferd

Ziel der durchgeführten Studie war die Entwicklung und Validierung einer geeigneten Analysemethode für Betamethason in equinem Plasma und Urin, um pharmakokinetische Untersuchungen nach intravenöser und dermaler Applikation bei Pferden durchführen zu können. Die entwickelte Analysemethode, bestehend aus der Probenaufarbeitung und anschließender Messung mittels HPLC/MS/MS, wurde nach den Parametern Richtigkeit, Präzision, Selektivität, Linearität, Stabilität und Wiederfindung validiert. Die Quantifizierungsgrenze für Betamethason lag im Plasma bei 0,1 ng/ml und im Urin bei 0,05 ng/ml und die Nachweisgrenze lag im Plasma bei 0,02 ng/ml und im Urin bei 0,01 ng/ml. In drei Versuchen ist jeweils sechs Pferden Betamethason appliziert worden. Zum einen ist Celestan® solubile in einer Dosierung von 0,04 mg Betamethason pro kg Körpergewicht intravenös verabreicht worden. Zum anderen ist Celestan®-V Salbe dermal auf zwei verschieden großen Flächen appliziert worden. Dabei handelte es sich um eine Dosierung von 4 g Celestan®-V Salbe auf eine 10 x 10 cm große Fläche und 8 g Celestan®-V Salbe auf eine 10 x 20 cm große Fläche. Nach intravenöser Applikation von Betamethason wurde die Nachweisgrenze im Plasma nach 51 Stunden und im Urin nach 132 Stunden unterschritten. Nach dermaler Verabreichung von 4 g Celestan®-V Salbe lagen die Betamethasonwerte im Plasma nach 80 Stunden und im Urin nach 292 Stunden unterhalb der Nachweisgrenze. Die Nachweisgrenze der mit 8 g Celestan®-V Salbe behandelten Pferde lag im Plasma nach 64 Stunden und im Urin nach 232 Stunden unterhalb der Nachweisgrenze. Neben der Bestimmung der Betamethasonkonzentrationen in Plasma und Urin wurden zusätzlich die Cortisolkonzentrationen im Plasma ermittelt, um den Einfluss von Glukokortikoiden nach unterschiedlichen Applikationsformen auf diesen Parameter beurteilen zu können. Nach intravenöser Verabreichung konnte eine Cortisolsuppression über 48 Stunden gezeigt werden. Nach dermaler Applikation von 4 g Celestan®-V Salbe war keine signifikante Suppression des Cortisol messbar und nach dermaler Applikation von 8 g Celestan®-V Salbe ergaben sich nach 24 und 96 Stunden supprimierte Cortisolwerte. Das nach intravenöser Applikation von Celestan® solubile erhaltene Datenmaterial war ausreichend um damit pharmakokinetische Parameter für Betamethason zu berechnen. Für die Berechnung wurde ein Zwei-Kompartiment-Modell verwendet. Die Maximalkonzentration lag nach den Berechnungen im Mittel bei 51 ng/ml und die Halbwertszeit lag im Mittel bei 3,35 Stunden. Aus den Ergebnissen wird deutlich, dass aufgrund der großen interindividuellen Schwankungen keine definitive, auf die Gesamtpopulation übertragbare Aussage über die Ausscheidungszeit von Betamethason gemacht werden kann. Die Möglichkeit einer positiven Dopingprobe nach dermaler Applikation von Betamethason wurde in dieser Arbeit bestätigt. Eine Unterscheidung der Applikationsformen anhand der ermittelten Betamethasonkonzentrationen ist jedoch nicht möglich. Jeglicher Nachweis von Betamethason im Plasma oder Urin muss daher als dopingrelevant gelten und entsprechend geahndet werden.