Nachweis von Mycobacterium avium ssp. paratuberculosis bei Schlachtrindern

Ziel der Arbeit war es herauszufinden, ob im Rahmen der Schlachtkörperuntersuchung eine sichere Erkennung von mit Mycobacterium avium ssp. paratuberculosis (MAP) infizierten Tieren und damit eine Prävalenzerhebung möglich ist. Die Untersuchung wurde in zwei Teilstudien untergliedert. Die Probenentnahme geschah auf zwei Schlachthöfen. In Teilstudie 1 wurden 50 Rinder mit makroskopischen Veränderungen einer granulomatösen Enteritis beprobt. In Teilstudie 2 wurden 150 Rinder, die keine Anzeichen einer granulomatösen Enteritis aufwiesen, untersucht. In beiden Teilstudien wurden Gewebeproben von Ileum, Jejunum, Nll. mesenteriales und Nll. caecales entnommen und bakterioskopisch, kulturell, histologisch und mit histologischer und immunhistologischer Erregeranfärbung auf eine MAP-Infektion untersucht. In Teilstudie 1 konnten bei 49 der 50 makroskopisch selektierten Rinder eine Infektion mit MAP nachgewiesen werden. Eine Verdickung der Darmschleimhaut und schlecht verstreichbare Schleimhautfalten waren die am häufigsten dokumentierten makroskopischen Befunde am Darm. Diese konnten vor allem im Ileum beobachtet werden. Die Prävalenz makroskopisch veränderter, MAP-infizierter Tiere betrug 1,35% in Bezug auf die Gesamtzahl aller visuell und palpatorisch untersuchten Schlachtrinder.    In Teilstudie 2 erwiesen sich 28,7% der 150 beprobten Tiere trotz fehlender makroskopischer Veränderungen als MAP-infiziert. Für eine Prävalenzerhebung auf Basis der Schlachtkörperuntersuchung sind daher auch makroskopisch unverdächtige Tiere zu untersuchen, da sich darunter eine große Dunkelziffer MAP-infizierter Tiere verbergen kann. Neben der Ermittlung der Prävalenz wurde ein Methodenvergleich durchgeführt. In Teilstudie 1 bei Untersuchung von Rindern mit meist fortgeschrittenen Veränderungen wiesen die kulturelle und histologische Untersuchung die gleiche Sensitivität auf. Die histologische Untersuchung kann als schnell durchzuführende Methode für die Untersuchung makroskopisch veränderter Schlachtrinder empfohlen werden. Bei Beprobung der sich in frühen Phasen der Infektion befindlichen Tiere aus Teilstudie 2 zeigten die Histologie sowie die Methoden der direkten Erregeranfärbung (Bakterioskopie, Ziehl-Neelsen-Färbung, Immunhistologie) eine geringe Sensitivität. Mittels kultureller Untersuchung konnten in Teilstudie 2 die meisten Tiere als infiziert erkannt werden, so dass diese Methode für die Durchführung einer Prävalenzerhebung angewendet werden sollte.  Anhand der beobachteten histologischen Veränderungen und der Erregerlast im Gewebe wurden die Organe in histologische Scores eingruppiert. Die zellulären Subpopulationen in den granulomatösen Veränderungen wurden immunhistologisch charakterisiert, um zu überprüfen, inwieweit sich Organe mit verschiedenen Ausprägungsgraden histologischer Veränderungen innerhalb der granulomatösen Läsionen in ihrer zellulären Zusammensetzung unterscheiden und ob die ungleichen Ausprägungsgrade auf Unterschiede in der lokalen Abwehr zurückgeführt werden können. Es wurden folgende Zelltypen markiert: Makrophagen, Epitheloidzellen, Riesenzellen, CD4+-T-Zellen, CD8+-T-Zellen, γd-T-Zellen, CD1+-Zellen, MHC-II+-Zellen, IgA+Plasmazellen. Organe mit verschiedenen Ausprägungsgraden histologischer Veränderungen unterschieden sich innerhalb der granulomatösen Läsionen hinsichtlich ihrer zellulären Zusammensetzung. Epitheloidzellen und Riesenzellen stellten in den veränderten Bereichen den dominierenden Zelltyp dar, wobei ihr jeweiliger Anteil in den histologischen Scores variierte. Die Anzahl an CD4+- und CD8+-T-Zellen war in den granulomatösen Läsionen reduziert. In Organen MAP‑negativer Tiere und bei geringgradigen Veränderungen (HS 1-2) überwog der Anteil der CD4+‑T-Zellen gegenüber den CD8+-T-Zellen. Bei ausgeprägten und multibazillären Läsionen (HS 3, 5, 6) nahm die relative Häufigkeit der CD4+-T-Zellen zu Gunsten der CD8+-T-Zellen ab. Bei multibazillär infiltrierten Proben konnte eine Zunahme von IgA+Plasmazellen um die Läsionen beobachtet werden. In den granulomatösen Läsionen war eine Verminderung der Expression bzw. die Abstoßung von antigenpräsentierenden (CD1, MHC-II) sowie antigenerkennenden (CD4) Molekülen auf der Zelloberfläche zu finden. Die in dieser Arbeit ermittelte hohe Prävalenz MAP-infizierter Schlachtrinder zeigt, dass die Paratuberkulose eine bedeutende Infektionskrankheit der Rinderbestände in Deutschland darstellt. Aufgrund ihrer Bedeutung für den Verbraucherschutz ist eine stärkere Bekämpfung der Paratuberkulose auch auf Bundesebene erforderlich.