Untersuchungen von Histaminrezeptoren am kaninen Darm und bei Hunden mit chronischen idiopathischen Darmentzündungen

Bei der kaninen inflammatory bowel disease handelt es sich um eine heterogene Gruppe chronischer Enteritiden, deren Ätiologie unbekannt und deren Pathogenese nur unzureichend geklärt ist. Immunologische, genetische, mikrobielle und umweltbedingte Einflüsse werden vermutet. Zahlreiche Untersuchungen haben gezeigt, dass Mastzellen und deren Mediator Histamin bei der IBD eine zentrale Rolle spielen. Für die Diagnose dieser Erkrankung ist eine Entnahme von Bioptaten aus Magen, Dünn- oder Dickdarm und deren histologische Untersuchung unabdingbar. Ziel dieser Arbeit war die Untersuchung der Expression verschiedener Histaminrezeptoren (H1R, H2R und H4R) im Magendarmtrakt von gesunden Kontrollhunden und bei Hunden mit IBD, die entzündliche Infiltrate in verschiedenen intestinalen Lokalisationen aufwiesen. Dazu wurden formalinfixierte und in Paraffin-eingebettete Vollschichtproben aus Magen, Duodenum, Jejunum, Ileum und Kolon von 24 Kontrollhunden sowie endoskopisch entnommene Bioptate aus Magen, Duodenum und/oder Kolon von insgesamt 25 Hunden mit IBD immunhistochemisch unter Verwendung kommerziell erhältlicher, polyklonaler Antikörper untersucht. H1R und H2R zeigten ein ähnliches Verteilungsmuster und wurden durch Enterozyten, Haupt- und Epithelzellen im Magen, Immunzellen der Lamina propria mucosae und der Peyer-Platten, Myozyten und enterale Nervenplexus exprimiert. Der H4R wurde ebenfalls durch Enterozyten, Immunzellen, Myozyten und Ganglien exprimiert, jedoch ergaben sich Zweifel an der Epitopspezifität und Eignung des verwendeten Antikörpers. Zusätzlich wurde mittels eigens hergestellter Sonden eine in situ-Hybridisierung gegen H4R-mRA an Proben aus Duodenum und Kolon von 9 Kontrollhunden und 6 Hunden mit IBD durchgeführt. Eine Expression von H4R-mRA durch Enterozyten, Immunzellen und Neuronen des Plexus submucosus konnte am Material der Kontrollhunde gezeigt werden. Die Ergebnisse der in situ-Hybridisierung an den Bioptaten der erkrankten Tiere waren sehr heterogen, was möglicherweise durch fixationsbedingte Schäden an der mRNA bedingt wurde. Eine semiquantitative Auswertung der immunhistochemischen Ergebnisse zeigte altersabhängige Veränderungen sowie einen Anstieg der Expression von H1R, H2R und teilweise auch H4R bei Hunden mit IBD. Die beiden untersuchten IBD-Formen, LPE und EGE, zeigten weitestgehend keine unterschiedliche Expression. Da Histamin über seine spezifischen Rezeptoren viele Funktionen im Magendarmtrakt, wie Motilität, Sekretion, Permeabilität und Immunregulation, beeinflusst, könnte eine vermehrte Expression dieser Rezeptoren bei der kaninen IBD pathogenetisch bedeutsam sein und gastrointestinale Symptome wie Diarrhö und abdominale Schmerzen verstärken. Möglicherweise handelt es sich jedoch auch um eine unspezifische Expressionsveränderung, die mit den entzündlichen Prozessen einhergeht ohne diese hervorzurufen (Epiphänomen). Weitere Untersuchungen mittels quantitativer PCR könnten möglicherweise Aufschlüsse über einen Anstieg der Expression auf m-RNA-Ebene geben. Die Herstellung und Validierung eines Antikörpers gegen das kanine H4R-Protein ist wünschenswert und würde eine sichere Darstellung des Rezeptors im Gastrointestinaltrakt und anderen kaninen Geweben ermöglichen.