Monitoring von antithrombotischen Medikamenten bei der Katze

Im ersten Teil der vorliegenden Studie wurde anhand der Wirkung auf die Ergebnisse des Plättchenfunktionsanalysegerätes PFA-100® und die Vollblutaggregometrie untersucht, ob der Thrombozytenaggregationshemmer Clopidogrel in reduzierter täglichen Dosis vom 10 mg/Katze dieselbe Effektivität wie die derzeitige Standarddosis von 18,75 mg (1/4 75 mg Tablette) aufweist. Im methodischen Vorversuch wurde u. a. die Eignung des Plättchenfunktionanalysegerätes PFA-100® zur Messung von Katzenblut evaluiert. Dafür wurden von 59 klinisch gesunden Katzen, ohne Abweichungen im hämatologischen oder klinisch-chemischen Blutprofil, gepufferte Citratblutproben getestet und Referenzwerte mittels 2,5%- und 97,5%-Quantil erstellt. Darüber hinaus wurden für die Impedanz-Aggregometrie mit dem Multiplate®-Analyser im mit Hirudin antikoagulierten Blut verschiedene Konzentrationen der Agonisten ADP, Arachidonsäure und Kollagen getestet, um für die Katze optimierte Konzentrationen zu ermitteln. Im Hauptversuch haben zwei Gruppen von sechs Katzen einmal täglich entweder 10 mg bzw. 18,75 mg Clopidogrel über sieben Tage erhalten. Nach definierten Zeitpunkten an den Tagen 1, 2, 3, 5 und 7 wurde den Katzen einmal täglich für die Messung mittels Plättchenfunktionanalysegerät und Multiplate®-Analyser eine gepufferte Citrat- und eine Hirudinblutprobe entnommen.   Unter Verwendung der Kollagen/ADP-Testkartusche wurde ein Referenzbereich für die Verschlusszeit des Plättchenfunktionanalysegerätes von 48–205 Sekunden ermittelt, während 9/52 Messungen mit der Kollagen/Epinephrin-Testkartusche den Messbereich überschritten. Aggregationsergebnisse mit dem Multiplate®-Analyser zeigten eine deutliche interindividuelle Variation, wobei Agonistenendkonzentrationen von (2–)5 µmol/l ADP, (0,2–)0,5 mmol/l Arachidonsäure und 2 (1–3) µg/ml Kollagen geeignet erscheinen. Im Hauptversuch zeigten beide Clopidogreldosierungen im Vergleich zum Ausgangswert einen signifikanten hemmenden Effekt auf die Ergebnisse des Plättchenfunktionsanalysegerätes und die Geschwindigkeit (velocity) der mit 2,5 oder 5 µmol/l ADP induzierten Plättchenaggregation (P < 0,05). Lediglich am ersten Tag zeigten die Katzen, die 10 mg Clopidogrel erhalten haben, keine signifikanten Veränderungen in der Verschlusszeit des Plättchenfunktionsanalysegerätes und in der mit 5 µmol/l ADP induzierten Plättchenaggregation. Die beiden Clopidogreldosierungen im Vergleich zeigten an keinem Tag signifikante Unterschiede zwischen den gemessenen Werten.   Der zweite Teil dieser Studie befasste sich mit der Etablierung der Messung der endogenen Thrombingenerierung (TG) nach der „Calibrated automated Thrombography“ (CAT)-Methode bei der Katze, unter besonderer Berücksichtigung ihrer Verwendbarkeit zum Monitoring des antikoagulatorischen Effektes des neuen oralen Faktor Xa-Hemmers Apixaban. Der methodische Vorversuch diente der Überprüfung der Präzision und der Erstellung der Referenzwerte aller Parameter der TG beim Einsatz von kommerziellen Aktivatorreagenzien mit verschiedenen Tissue Factor (TF)-Konzentrationen. Dafür wurden von 58 klinisch gesunden Katzen Blutproben gewonnen. Die gepufferten plättchenarmen Citratblutproben wurden in Aliquots portioniert und bei -80°C bis zur Untersuchung eingefroren. Für die Untersuchung der TG standen drei verschiedenen TF-Reagenzien für die Messung von plättchenarmem Plasma (platelet poor plasma, PPP) zur Verfügung (PPP Reagent 1 pM, PPP Reagent 5 pM, PPP Reagent 20 pM). Jede Messung wurde als Dreifachbestimmung durchgeführt und daraus der Median für die weiteren Berechnungen ermittelt. Die Referenzwerte wurden mittels 2,5%- und 97,5%-Quantil bestimmt. Im Hauptversuch bekamen 6 Katzen einmalig 2,5 mg Apixaban verabreicht. Vor der Tablettengabe und 2, 4, 6 und 8 Stunden danach wurden den Katzen Citratblutproben entnommen und neben der TG auch die Apixabankonzentration (über die Anti-Xa-Aktivität), Thrombelastometrie, Prothrombinzeit (PT), aktivierte partielle Thromboplastinzeit (aPTT) und der Hämatokritwert gemessen.   Die Variantionskoeffizienten (VKs) für die Dreifachmessung zur Bestimmung der Referenzwerte lagen im Median bei unter 10 %. Die einzige Ausnahme bildete der Thrombinpeak beim PPP Reagent 1 pM (14,6 %). Die niedrigsten VKs ergaben sich für PPP Reagent 20 pM. Geringfügig bis moderat höhere VKs wurden für die Messung von Proben von Katzen errechnet, die mit Apixaban antikoaguliert worden waren. Die Referenzwerte aller Messgrößen der TG wiesen deutliche Unterschiede bezüglich des verwendeten TF-Reagenzes auf. Erwartungsgemäß nahmen die Latenzzeit und Reaktionsdauer mit steigender Konzentration ab und der Thrombinpeak zu. Nach oraler Gabe von 2,5 mg Apixaban an Katzen wurden maximale Apixabankonzentrationen (gemessen basierend auf der Anti-Xa-Akivität) nach 2 Stunden (Median 458 mg/ml) erzielt, wobei diese bis zum Versuchsende wieder deutlich abfielen. Apixaban hatte einen signifikanten Einfluss auf alle Parameter der TG. Auch hier war das Ausmaß der Auswirkung abhängig von der verwendeten TF-Konzentration. Das endogene Thrombinpotential reagierte am wenigsten sensitiv im Vergleich zu den anderen TG-Parametern. Weniger sensitiv gegenüber dem Effekt von Apixaban im Katzenblut waren die Gerinnungstests PT und aPTT, obgleich sie signifikante Veränderungen aufwiesen. Die Ergebnisse der Thrombelastometrie wurden von Apixaban nur sehr partiell beeinflusst. Enge Korrelationen zur Apixabankonzen-tration fanden sich für verschiedene TG-Parameter, besonders die Reaktionsdauer (rS = 0,789 [PPP Reagent 5 pM]; rS = 0,880 [PPP Reagent 20 pM]) und auch Latenzzeit, während die übrigen Hämostasetests allenfalls moderat enge Korrelationen zur Apixabankonzentration aufwiesen.   Die Ergebnisse des ersten Studienteils zeigen auf, dass eine tägliche Dosis von 10 mg Clopidogrel pro Katze, gemessen an den verwendeten Methoden, genauso effektiv in der Wirkung ist wie 18,75 mg. Allerdings wäre es hierbei von Vorteil, eine höhere Initialdosis zu verwenden, um schneller einen wirksamen Blutspiegel zu erreichen. Diese ex-vivo Ergebnisse müssen noch in klinischen Wirksamkeitsstudien bestätigt werden. Zudem deutet sich die Verwendbarkeit des Plättchenfunktionsanalysegerätes PFA-100® mit Kollagen/ADP-Testkartuschen für das Monitoring von Aggregationshemmern bei der Katze an.   Der zweite Studienteil lässt erkennen, dass sich die TG für die Messung von Katzenplasma einschließlich des Monitorings einer Therapie von Apixaban eignet. Für Letzteres sind PPP Reagent 5 pM, PPP Reagent 20 pM zu bevorzugen. Die PT, aPTT und Thrombelastometrie sind hingegen deutlich insensitiver und damit ungeeignet für das Apixabanmonitoring bei der Katze. Des Weiteren scheint der Faktor Xa-Hemmer Apixaban von der Katze in einer einmaligen Dosierung gut vertragen zu werden. Es bleibt allerdings noch zu klären, welches die optimale Dosis für Katzen ist und ob eine wiederholte Gabe genauso gut vertragen wird.