In-vitro- und Ex-vivo-Untersuchungen augenschädigender Wirkungen von Arzneistoffen

Ziel dieser Arbeit war die Etablierung von In-vitro- und Ex-vivo-Untersuchungsmethoden zur Untersuchung möglicher augenschädigender Wirkungen von Arzneistoffen.   Ein weiteres Ziel dieser Arbeit war es, auf der Basis von in Literatur und Pharmakovigilanzmeldungen beschriebenen Fällen mit augenschädigender Wirkung von Arzneistoffen bei Hund und Katze, das augenschädigende Potential einiger Arzneistoffe zu untersuchen.   Untersucht wurden die zytotoxischen und die phototoxischen Grenzwerte der Arzneistoffe an Zellen der Zelllinien R28 (Retina) und ARPE-19 (retinales Pigmentepithel).   Dazu wurden verschiedene Zellkulturversuche zum Nachweis einer zytotoxischen Wirkung der Testsubstanzen etabliert. Die Zellen wurden in verschiedenen Versuchsansätzen zur Untersuchung der phototoxischen Wirkung zu unterschiedlichen Zeitpunkten mit UV-Licht bestrahlt.   Als Ex-vivo-Modell zur Untersuchung des Einflusses von Spinosad, Milbemycinoxim und Ivermectin auf die Barrierefunktion der Blut-Retina-Schranke wurde retinales Pigmentepithel in der Ussingkammer untersucht.   Erste signifikante Reduktionen der zellulären Vitalität der R28-Zellen traten bei Spinosad, Milbemycinoxim Ivermectin und Chlorpromazin bei 20 µmol/ml, Ciprofloxacin, Enrofloxacin, Danofloxacin und Ciclosporin in einer Konzentration von 200 µmol/ml, bei Marbofloxacin, Betamethason und Ketoprofen in einer Konzentration von 2000 µmol/ml auf. Die geringsten Konzentrationen bei denen in Verbindung mit UV-Licht die Vitalität signifikant vermindert war, betrug für Chlorpromazin 2 µmol/ml, für Spinosad, Ivermectin, Betamethason, Ketoprofen und Ciclosporin 5 µmol/ml, für Danofloxacin und Milbemycinoxim 20 µmol/ml, für Ciprofloxacin und Enrofloxacin 200 µmol/ml und für Marbofloxacin 500 µmol/ml an R28-Zellen.   Für ARPE-19-Zellen konnten erste signifikante Reduktionen der zellulären Vitalität ab 50 µmol/ml bei Spinosad, Milbemycinoxim und Ivermectin, 200 µmol/ml bei Danofloxacin und Chlorpromazin, 500 µmol/ml bei Ciprofloxacin und Enrofloxacin und 2000 µmol/ml bei Marbofloxacin und Betamethason gezeigt werden. Die geringsten Konzentrationen mit signifikanter Reduktion der Zellvitalität der ARPE-19-Zellen in Verbindung mit UV-Licht lagen bei 5 µmol/ml für Milbemycinoxim, bei 20 µmol/ml für Ivermectin und Chlorpromazin, bei 50 µmol/ml für Spinosad, bei 200 µmol/ml für Ciprofloxacin, Danofloxacin, Marbofloxacin und Ketoprofen und bei 500µmol/ml für Enrofloxacin.   Die Ergebnisse aus der Ussingkammer hatten eine sehr hohe Variabilität, diese Methode bedarf einer Weiterentwickung. Es lassen sich lediglich Tendenzen ableiten, wonach es in Einzelfällen durch Spinosad und Ivermectin zu einer erhöhten Substratkonzentration auf der Retinaseite des retinalen Pigmentepithels kam.